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冻卵

冻卵,全称为卵母细胞冷冻,是一种辅助生殖技术的衍生技术。它涉及通过医学手段穿刺卵巢获取女性的成熟卵母细胞(即卵子),并利用专业的冻存技术将这些卵母细胞冷冻后,长期保存在超低温环境(通常是液氮中,温度达到-196℃)中。目的是为了在未来某个时间点,当女性有生育需求时,可以将冷冻的卵母细胞解冻复苏,进而通过体外受精-胚胎移植技术实现生育。

名称

冻卵

英文名称

oocyte freezing

别名

卵母细胞冷冻

应用学科

生殖医学科

出处

生殖医学名词

概述

概念

冻卵,全称为卵母细胞冷冻,是一种辅助生殖技术的衍生技术。它涉及通过医学手段穿刺卵巢获取女性的成熟卵母细胞(即卵子),并利用专业的冻存技术将这些卵母细胞冷冻后,长期保存在超低温环境(通常是液氮中,温度达到-196℃)中。目的是为了在未来某个时间点,当女性有生育需求时,可以将冷冻的卵母细胞解冻复苏,进而通过体外受精-胚胎移植技术实现生育。

分类

冻卵可以根据冷冻方法、卵母细胞成熟度、冷冻保存时间等标准进行分类。

1、按冷冻方法分类

(1)慢速冷冻:也称程序化冷冻,是一种传统的卵母细胞冷冻方法。该方法通过逐步降低温度,使卵母细胞在冷冻过程中充分脱水,以减少冰晶的形成。然而,慢速冷冻所需时间较长,且易形成冰晶,可能对卵母细胞造成损伤。

(2)玻璃化冷冻:是一种更为先进的卵母细胞冷冻方法。该方法利用高浓度的冷冻保护剂使卵母细胞快速脱水,并通过极高的降温速率使细胞内外液体均达到玻璃化状态,从而避免冰晶的形成。玻璃化冷冻具有操作简便、存活率高的优点,已成为目前卵母细胞冷冻的首选方法。

2、按卵母细胞成熟度分类

(1)未成熟卵母细胞冷冻:包括GV期(生发泡期)和MⅠ期(第一次减数分裂中期)的卵母细胞。未成熟卵母细胞易获得且数量多,但其体外成熟培养技术尚不成熟,因此冷冻后的成熟率、受精率及妊娠率均较低。

(2)成熟卵母细胞冷冻:即MⅡ期(第二次减数分裂中期)的卵母细胞。成熟卵母细胞是卵母细胞冷冻中最常见的类型,但由于其体积大、含水量高、存在减数分裂纺锤体等特点,冷冻过程中易发生损伤。

3、按冷冻保存时间分类

(1)短期冷冻:通常指冷冻保存时间在数月至数年之间的卵母细胞。短期冷冻的卵母细胞在解冻后的存活率和临床结局相对较好。

(2)长期冷冻:指冷冻保存时间超过数年的卵母细胞。目前关于长期冷冻对卵母细胞临床结局的影响尚不完全清楚,但已有一些成功报道表明,长期冷冻的卵母细胞在解冻后仍有可能获得良好的临床结局。

操作目的

冻卵的操作目的包括保障女性生育权利、提高生育计划灵活性、促进辅助生殖技术发展、建立卵子库等。

1、保障女性生育权利

对于卵巢早衰等生殖系统疾病患者,冻卵技术为她们提供了通过辅助生殖技术实现生育的可能性,无需依赖捐赠卵子。冻卵还适用于因肿瘤放化疗等医疗手段可能损伤卵巢功能的女性,通过提前冷冻卵子,为未来的生育机会提供保障。

2、提高生育计划灵活性

现代职场女性往往面临职业发展与生育计划的冲突,冻卵技术为她们提供了一个新的选择,允许她们在更合适的时间进行生育。对于有遗传性疾病风险的女性,如Turner综合征、脆性X染色体前突变等,冻卵也是一种预防性措施,有助于保障后代的健康。

3、促进辅助生殖技术发展

冻卵技术的应用有助于丰富和完善辅助生殖技术的手段,提高IVF(体外受精)等技术的成功率。在取卵日取精失败、卵巢过度刺激综合征等特殊情况下,冻卵技术为临床提供了便捷、安全的备选方案。

4、建立卵子库

通过冻卵技术建立的卵子库,可以为需要捐赠卵子的患者提供安全、可靠的卵源,缓解卵源稀缺的问题。

适用人群

1、面临放疗和化疗的肿瘤患者。

2、需要预防性切除卵巢的遗传性疾病患者。

3、伴侣于体外受精取卵日取精失败者。

4、受法律、宗教、伦理的限制而无法进行胚胎冷冻的人群。

5、因职业、经济或其他个人原因需要延迟生育的女性。

6、卵巢低反应女性。

禁忌人群

1、不符合医学伦理或法律规定的人群。

2、存在严重身体疾病或感染的人群。

3、卵巢功能低下或衰退的人群。

4、对麻醉药物过敏或不能耐受的人群。

5、已知存在遗传性疾病风险的人群。

操作过程

冻卵的操作过程包括术前检查、促排卵、取卵、预处理、平衡与脱水、装载与冷冻、储存、解冻与复苏、后续处理等步骤。

1、术前检查

患者在接受取卵手术前,会进行一系列的身体检查,包括激素水平、超声检查、传染病筛查、遗传咨询等,以确保身体健康状况适合进行取卵,并确定最佳的取卵时机。

2、促排卵

根据患者年龄、基础性激素水平、窦卵泡数目等卵巢储备功能评价指标选择促排方案,一般是在月经期的第2或第3天通过注射促排卵药物来获得更多成熟卵母细胞,用药过程大约是7~12天。

3、取卵

取卵手术通常在全身麻醉或局部麻醉下进行,以确保患者在手术过程中保持舒适。医生会使用超声探头确定卵泡的位置,并通过阴道将一根细长的取卵针穿入卵巢。取卵针连接到负压吸引装置,用于将卵泡液及卵母细胞吸出。这个过程可能需要多次穿刺,以收集所有成熟的卵泡。

4、预处理

选择成熟的卵母细胞(通常是MⅡ期卵母细胞),这些卵母细胞在冷冻前需要进行评估,确保其质量适合冷冻。卵母细胞可能需要在特定的培养液中短暂培养,以保持其最佳状态。

5、平衡与脱水

将卵母细胞在含有较低浓度冷冻保护剂的溶液中平衡一段时间(通常为5~10分钟),使其逐渐适应冷冻环境。然后,将卵母细胞转移到含有更高浓度冷冻保护剂的溶液中再平衡一段时间(如1分钟),这一步骤是为了进一步脱水,减少细胞内水分,从而避免冷冻过程中冰晶的形成。

6、装载与冷冻

将含有卵母细胞的微量冷冻保护液滴装载到冷冻载体(如麦管、毛细管或尼龙环等)中。直接将冷冻载体投入液氮中进行快速冷冻。在这一过程中,冷冻保护剂的高浓度和快速降温速率(可达20000℃/min)使细胞内外液体迅速达到玻璃化状态,避免了冰晶的形成。

7、储存

冷冻后的卵母细胞在液氮中长期储存,直到需要使用。储存过程中,需要定期检查液氮罐的液氮水平和储罐的完整性,以确保卵母细胞的安全。

8、解冻与复苏

需要使用卵母细胞时,将其从液氮中取出,并迅速进行解冻。解冻过程需要精细控制温度和时间,以减少对卵母细胞的损伤。对解冻后的卵母细胞进行评估,以确定其复苏存活率和是否适合进一步使用(如体外受精)。

9、后续处理

解冻并复苏的卵母细胞可能需要进行体外受精(如常规体外受精或卵胞质内单精子显微注射),然后培养成胚胎。培养的胚胎可以在适当的时机进行胚胎移植,以尝试实现妊娠。

操作风险

冻卵的操作风险包括取卵风险、冷冻损伤、交叉污染、长期储存风险等。

1、取卵风险

取卵手术虽然属于微创手术,但仍存在感染、出血等风险。手术过程中还可能会损伤邻近器官,如膀胱、直肠等。此外,对卵巢的刺激还可能引起卵巢过度刺激综合征。

2、冷冻损伤

卵母细胞在冷冻和复苏过程中极易发生冷冻损伤,可能导致其存活率下降或功能受损。

3、交叉污染

开放式冷冻载体(如改良的吸管、毛细管和尼龙环等)冷却速率高,但卵母细胞直接暴露于未经消毒的液氮中,存在交叉污染的风险。

4、长期储存风险

卵母细胞长期储存于液氮罐中可能存在一定风险,如储罐破裂等突发事件可能导致储存材料损失。

误区提示

冻卵可以无限期保存?

冻卵可以无限期保存的观点是不准确的。虽然现有研究表明,玻璃化冷冻技术可以使卵母细胞在较长时间内保持存活率和一定的临床妊娠率,但长期冷冻保存仍存在一定的风险。例如,长时间的冷冻可能导致冷冻保护剂的毒性累积,影响卵母细胞的质量。此外,储罐破裂等突发事件也可能导致卵母细胞的损失。因此,虽然卵母细胞可以冷冻保存多年,但并不能保证无限期保存的有效性。

冻卵出生的孩子更容易出现健康问题?

冻卵出生的孩子更容易出现健康问题的说法缺乏科学依据。现有研究表明,冷冻卵母细胞子代的安全性与自然受孕出生的孩子相比并无显著差异。多项研究对比了冷冻卵母细胞出生的婴儿与新鲜卵母细胞出生的婴儿在孕期并发症、出生体重、Apgar评分、新生儿出生缺陷、重症监护室住院率及病死率等方面的数据,均未发现统计学差异。因此,冷冻卵母细胞子代的安全性并不低于自然受孕的孩子。然而,仍需注意的是,由于卵母细胞冷冻技术仍处于不断发展阶段,长期随访研究的数据仍然有限,所以临床应用仍需谨慎。

冻卵的存活率很低?

冻卵的存活率并非普遍很低,而是受多种因素影响。玻璃化冷冻技术已显著提高卵母细胞的复苏存活率,报道显示其存活率可达90%~97%。然而,其存活率仍受女性年龄、卵母细胞成熟度、冷冻方法及冷冻载体等多种因素的影响。建议女性在最佳生育年龄(如30~35岁)进行卵母细胞冷冻,以提高成功率。

冻卵适用于所有女性?

冻卵并非适用于所有女性。首先,冻卵需要一定的经济投入,并且成功率受多种因素影响,如女性年龄、卵母细胞成熟度等。其次,我国法律规定禁止单身妇女实施人类辅助生殖技术,因此单身女性在国内尚不能通过冻卵保存生育力。此外,冻卵主要适用于有生育力保存需求的女性,如面临放疗和化疗的肿瘤患者、需要延迟生育的女性等。因此,在决定是否进行冻卵之前,女性应充分了解相关信息并咨询专业医生。

其他

参考文献

[1]杨金姬,李红义.人卵母细胞冷冻研究进展[J].医学综述,2019,25(24):4940-4944.

[2]吴霜,刘婷婷,李文.人类卵母细胞冷冻技术研究进展[J].中国医学前沿杂志(电子版),2017,9(08):17-22.

[3]王琰,柴三明,倪亚莉,等.卵母细胞冷冻的临床应用进展[J].医学综述,2017,23(11):2094-2097.

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